3.3. In vitro rannsóknir

3.3.1. Mat á frumueitrun í keratínfrumum úr mönnum

Samkvæmt viðeigandi rannsóknum,cistancheer algeng jurt sem er þekkt sem "kraftaverkajurtin sem lengir lífið". Aðalþáttur þess ercistanoside, sem hefur ýmis áhrif eins ogandoxunarefni, bólgueyðandi,ogefling ónæmisvirkni. Meginreglan milli cistanche oghúðhvíttunliggur í andoxunaráhrifumcistanche glýkósíð. Melanín í húð manna er framleitt með oxun týrósíns sem hvatar aftýrósínasa, og oxunarviðbrögðin krefjast þátttöku súrefnis, þannig að súrefnislausu stakeindir í líkamanum verða mikilvægur þáttur sem hefur áhrif á melanínframleiðslu. Cistanche inniheldur cistanoside, sem er andoxunarefni og getur dregið úr myndun sindurefna í líkamanum, þannig aðhamlar framleiðslu melaníns.

Smelltu á Cistanche Powder Bulk

Fyrir frekari upplýsingar:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

MTT prófið var notað til að prófa hvort PPEE, PPEE-SLNs og KDPAG gætu haft áhrif á lífvænleika frumna með því að nota keratínfrumur úr mönnum. Mismunandi styrkur PPEE, PPEE-SLNs, útdráttarlausra SLNs og KDPAG við 0.{{10}}625– 1mg/ml voru ræktaðar á 24 klst. með frumulínu frá mönnum (Mynd 2). Á 24 klst. sást engin marktæk minnkun á lífvænleika keratínfrumna úr mönnum á styrkleikabilinu 0.0625–0,5 mg/ml (p < 0,05). Hins vegar, eftir meðferð með 1 mg/mL af PPEE, PPEE-SLNS, Extract-free-SLNs og KDPAG yfir 24 klst., kom fram marktæk minnkun á lífvænleika frumna keratínfrumna úr mönnum, 93 prósent, 90 prósent, 95 prósent, og 89 prósent frumanna lifðu af, í sömu röð. Þannig var styrkur PPEE, PPEE-SLNs og KDPAG jafn eða lægri en 0,5 mg/ml notaður fyrir síðari rannsóknir.

Andoxunarvirknin var metin með því að nota DPPH, ABTS kerfi og -karótínbleikjaprófið. Í öllum prófuðum sýnum fannst styrktarháður háttur. Í DPPH prófinu sýndi KDPAG mestu hreinsivirknina, fylgt eftir af PPEE-SLN og síðan PPEE. IC50 gildin voru 6,35 ± 3,4{{30}} µg/mL, 8,79 ± 2,70 µg/mL og 10,5 ± 1,81 µg/ml í sömu röð miðað við C-vítamín notað sem staðall með IC50 2 ± 0,01 µg/mL. Þessi þróun sást einnig gagnvart ABTS róttækum með gildið 3,91 ± 1,43 µg/mL, 4,29 ± 1,12 µg/mL og 6,10 ± 0,62 µg/mL, í sömu röð, samanborið við staðlaða Vit. C með IC50 0,96 ± 0,02 µg/mL sem staðfestir niðurstöður DPPH prófsins. Þegar hefur verið bent á slíka hreinsunarvirkni fyrir PP laufþykkni og hluta þeirra fyrir báðar greiningar en með hærri gildi en þær sem fengust [14,49]. Þessar niðurstöður benda til þess að virkni andoxunarefna sé fyrir áhrifum af umhverfisaðstæðum, plöntuhlutum, þroskastigi, uppskeruaðferð og leysiefnum sem notuð eru til útdráttar. Þessar niðurstöður eru í samræmi við bókmenntir þar sem PP laufþykkni reyndist hafa betri andoxunargetu en fræ, hýði, kvoða og ávaxtaþykkni í báðum prófunum [14,20,50]. Einnig var talið að hið háa flavonoid innihald PP laufa, einkum flavonól, bæri ábyrgð á andoxunarvirkni [20].

PPEE, PPEE-SLN og KDPAG sýndu and-elastasa, and-collagenasa og and-tyrosinasa virkni með hátt hlutfall hömlunar við 300 µg/mL og tiltölulega lágt IC50 gildi (tafla 3) samanborið við viðkomandi jákvæða samanburð.

3.4. Mat á PPEE-SLN og PPEE-SLN krem

Undirbúnar PPEE-SLN samsetningar sýndu kornastærðir frá 17 0 nm til 176 nm; þetta gefur til kynna að ef yfirborðsvirkt efni er bætt við föst lípíð nanóagnakerfi veldur það að yfirborðsfilman þéttist og verður stöðug. Samsetningar sýna lágt gildi fjöldreifingarstuðuls (0.23{{10}}–0.450) sem gefur til kynna einsleitni kornastærðardreifingar með ZP á milli -21.8 og -22.0 sem tryggir mikla stöðugleikaafurðir (Mynd 3a, b). Skráð 70–77 prósent af PPEE-SLN hjúpunarvirkni er vegna tegundar lípíðs (glýserólmónósterats) sem er fær um að loka yfirborðsholum í perlunum. TEM & SEM smásjármyndir sýndu myndun nanóagna með þröngri kornastærðardreifingu, sléttum, kúlulaga og einsleitum nanóseicles (Mynd 3c,d). Í FTIR sýnir PPEE einkennandi toppa við 3352 cm−1 sem samsvarar arómatískri aukaamíni NH teygju, 2974,23 cm−1 sem samsvarar arómatískri CH teygju, 1735,93 cm−1 sem samsvarar C=O teygju og 1257,59 cm−1. 1 sem samsvarar CN alifatískri amínteygju eins og birtist í (Mynd 4). FTIR litróf PPEE og lípíð eðlisfræðilegrar blöndu sýna sömu einkennandi toppa vegna arómatísks aukaamíns NH sem teygir sig við 3348,42 cm−1, C=O teygjast við 1735,93 cm−1 og CN alifatískt amín teygir sig við 1257,59 cm −1. Þannig er augljóst að allir einkennandi toppar sem voru til staðar í litróf PPEE endurtaka sig nánast á sama svæði í litróf PPEE-SLNs eðlisblöndunnar sem gefur til kynna að engin marktæk víxlverkun sé á milli lyfjanna og lípíðanna. PPEE-SLNs krem ​​(2 prósent og 5 prósent) voru gulleit með slétt útlit, slétt yfirborð og hæfilegt pH á bilinu 5–5,8 ± 0,15 sem staðfestir samhæfni lyfjaformanna við húðseytingu, ekki ertandi fyrir húð manna, nei roði eða bjúgur er til staðar, auðvelt að þvo með vatni og gott dreifigildi var á bilinu 10–13 g cm/s, með seigju á bilinu 500 ± 6,24 til 600 ± 7,52 CPS við 10 snúninga á mínútu, engin merki um fasaskilnað og góð samkvæmni á námstímanum. Heildarmagn baktería og myglusveppa var minna en 100 CFU/ml og á viðtökubili fyrir húðvörur. 2 prósent kremið sýndi upphaflega losun PPEE-SLNs um 15,21 ± 1,44 prósent á fyrstu 1 klst. í kjölfarið losnuðu PPEE-SLN sem voru föst í kremið smám saman; 60,32 ± 2,54 prósent losnuðu eftir 12 og 62 ± 1,44 prósent næstum eftir 24 klst. Á hinn bóginn sýndi 5 prósent kremið upphaflega losun PPEE-SLNs um 20,21 ± 2,70 prósent á fyrstu 1 klst. í kjölfarið losnuðu PPEE-SLN sem voru föst í kremið smám saman, 77,12 ± 2,88 prósent losnuðu eftir 12 og 80 ± 2,91 prósent næstum eftir 24 klst. Báðar kremformúlurnar sýndu lengri losun PPEE á 24 klst. (Mynd 5). Þar að auki sýndi rannsóknarrannsókn okkar að rjómablöndur (2 prósent og 5 prósent) eru stöðugar í tvo mánuði.

3.5. In-Vivo rannsóknir

Eftir tuttugu daga meðferð með kreminu voru hrukkuvörnin metin. Hrukkueyðandi áhrif PPEE-SLNs krems voru skammtaháð og áhrifin sem sáust í 5 prósent PPEE-SLNs kremhópnum (G5) voru sambærileg við niðurstöðuna í jákvæða samanburðarhópnum (G3), sem var meðhöndluð með markaðsvöru (Mynd 6) og sýndi marktækt betri hrukkueinkunn samanborið við venjulegt hrukkukrem. Ljósmyndirnar eru sýndar á mynd 7. Hópar (G3–G5) sýndu mjög slétt og endurbætt húðflöt. Engar húðbreytingar voru hjá G1 dýrum. Aftur á móti sýndi G2 þykkar og djúpar hrukkur.

Teygjanlegu trefjarnar minnkuðu marktækt vegna UV geislunar samanborið við venjulega hópinn. Húðmyndir fyrir ómeðhöndlaðar og meðhöndlaðar mýs voru skoðaðar með smásjá (mynd 8). G1 var með eðlilega húðþykkt bæði í leðurhúð og húðþekju og innihélt trefjafrumur, auk eðlilegrar teygjanlegrar trefjaþykktar án sundrunar. Í samanburði við G1 sýndi húð frá UV-geisluðu músunum (G2) marktæka aukningu á þykknun bæði húðþekju og leðurhúðs auk minnkunar á myndun fibroblasts og teygjanlegra trefja með UV-geislun. Staðbundin notkun 5 prósenta (G5) og 2 prósenta (G4) PPEE SLNs kremsins var sambærileg og G3 sem fékk vöruna í sölu. Öll G4 og G5 minnkuðu marktækt þykkt leðurhúðarinnar og húðþekjunnar og eykur innihald vefjafrumna þar sem fjöldi þeirra ákvarðar innihald kollagentrefja og hjálpuðu þannig til við að gera við skemmda húð og draga úr öldrunaráhrifum á húðina (Mynd 9a,b) . Einnig sýndu báðir hópar fyrirbyggjandi áhrif gegn niðurbroti teygjanlegra trefja með útfjólubláum geislun, svo við getum ályktað að meðferð með öðrum hvorum skammtinum af PPEE-SLNs kremi hafi sýnt verndandi áhrif gegn útfjólubláum geislun.

Fyrir frekari upplýsingar: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501